白癜风可以医治好么 https://m-mip.39.net/nk/mipso_4613578.html目的:规范HAV—IgM检测的操作范围:检验科免疫实验室责任人:免疫实验室专业组长和实验室工作人员应用仪器:酶标仪检测原理:将抗人IgM(μ链)包被于聚苯乙烯微量反应板孔内。加入被检血清,血清中IgM与载体上的抗人IgM结合。这种结合是非特异性的,因为除抗HAV—IgM的情况下,其它IgM的情况下,甲肝抗原才能与之结合,此为特异性结合。再加入酶标记的抗HAV—IgG,使之与载体上的甲肝抗原结合,最后加底物显色,判断结果。试剂:抗HAV—IgMELISA试剂盒标本收集:1、最好使用新鲜血清样本,如需保存,可置2-8℃冷藏48小时或-20℃冷冻4周。2、避免使用溶血、浑浊或脂血样本及反复冻融样本。试剂规格:每盒48人份试剂盒组成:1、预包被板48孔2、酶标记物3ml3、阳性对照1ml4、阴性对照1ml5、20倍浓缩洗液30ml6、底物缓冲液3ml7、底物液3ml8、封口袋1个9、说明书1份操作步骤:1、加样:将预包被板条固定于板架上。每次试验设阴性对照2孔、阳性对照2孔,分别加入阴、阳对照50μl;设空白对照1孔,不加样品。其余孔加入待测样品50μl。2、温育:置37oC孵育30分钟。3、洗涤:弃去孔内液体,将稀释后的洗涤液注满各孔,静置30-60s,弃去孔内洗液,扣干。重复6次。4、加酶标记物:空白对照孔不加任何液体,其余孔加入酶标记物50μl。5、温育:置37oC孵育30分钟。6、洗涤:弃去孔内液体,重复6次(同操作步骤3)。7、显色:每孔加入底物缓冲液50μl,再加入底物液50μl,振荡混匀,置37oC孵育15分钟。8、终止:每孔加入终止液50μl,轻拍混匀。结果判定:用酶标仪单波长nm(须以空白孔校零)或双波长nm/nm读取各孔OD值。质量控制:阳性对照OD值应≥0.3阴性对照OD值应≤0.1临界值(C.O.)计算:临界值(C.O.)=0.1+阴性对照平均OD值备注:阴性对照平均值OD值小于0.05按0.05计算,大于0.05按实际值计算。结果判读:样品OD值≥临界值(C.O.)为抗-HAV—IgM阳性样品OD值临界值(C.O.)为抗-HAV—IgM阴性注意事项:1、从冷藏环境中取出的试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔反应条应置37oC平衡30分钟后方可使用,余者应及时封存于冰箱中以备后用。在平衡试剂的同时,待测标本需置室温平衡30分钟后再行测试。2、使用前试剂应摇匀,并弃去1~2滴后垂直滴加。3、结果判断需在反应终止后15分钟内完成。4、不同批号的试剂不可混用。5、使用本试剂盒应视为有传染性物质,请按传染病实验室检查规程处理.参考范围:阴性临床意义:甲型肝炎病毒通过消化道传染,感染时呈阳性反应。甲型肝炎抗体(HAVAb)是感染甲肝病毒(HAV)后病人血中出现的一种抗体,属于HAV衣壳抗体。其中又分甲型肝炎抗体IgM(抗HAV-IgM)和甲型肝炎抗体IgG(抗HAV-IgG)。抗HAV-IgM为早期诊断甲型肝炎的指标。一般在甲型肝炎的早期此抗体为阳性,可在血中持续3~6个月,但有些感染者仅有1周左右的阳性期。如果为双向阳性,即阳性转阴后再次阳性,为复发性甲型肝炎。IgG检出表示有既往感染史,几乎终身存在。
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