好的白癜风医院在哪里 http://m.39.net/pf/a_7534559.html病历摘要患者男，51岁。于1周前出现厌食症状，胃口差，厌油腻，伴有乏力和全身不适。病程中患者睡眠差，小便黄，大便无特殊。平素健康良好，预防接种史不详，曾因胃出血输血ml。体格检查：体温36.5℃，巩膜黄，肝肿大有压痛及叩痛。余正常。甲肝抗体、乙肝两对半、丙肝抗体、乙肝抗体定量、乙型肝炎病毒核酸检查结果如下：××××医院检验报告单××××医院检验报告单××××医院检验报告单根据检验报告结果分析并结合患者的
临床表现，该患者初步考虑最可能的诊断是什么？乙肝病毒表面抗原、e抗原和核心抗体同时阳性，俗称“大三阳”，此阶段乙肝病毒在体内复制活跃，传染性强。乙型肝炎病毒核酸检测是判断有无传染性的更为准确的指标，该患者病毒载量高达3×，说明乙肝病毒在体内大量复制。因此该病例最可能的实验室诊断为乙型肝炎病毒感染，且体内病毒复制较为活跃，具有强传染性。思路1：乙型肝炎病毒感染血清标志物（乙肝两对半）医院最常用的乙型肝炎病毒（HBV）感染的血清标志物检测项目。包括：表面抗原（HBsAg）和表面抗体（抗HBs或HBsAb）、e抗原（HBeAg）和e抗体（抗HBe或HBeAb）、核心抗体（抗HBc或HBcAb）。目前肝炎病毒感染血清标志物的检测常用酶联免疫吸附试验、免疫层析试验、化学发光免疫分析和时间分辨荧光免疫测定，病毒核酸载量的检测常用荧光定量PCR技术。思路2：酶联免疫吸附试验检测乙肝两对半的方法主要有：双抗体夹心法检测HBsAg和HBeAg，双抗原夹心法检测HBsAb、竞争抑制法检测HBcAb和HBeAb。（1）双抗体夹心法原理：将表面抗体或e抗体包被微孔板，如待检血清中存在HBsAg或HBeAg则抗原抗体结合形成免疫复合物，洗涤后加入酶标记抗体；与免疫复合物中的特异抗原结合形成酶标抗体-待检抗原-固相抗体复合物，加底物显色，显色强弱与待检血清中的HBsAg或HBeAg含量呈正比，以此判断被检血清中是否存在HBsAg或HBeAg。（2）双抗原夹心法原理：微孔板上包被的单克隆HBsAg和待检血清中的HBsAb结合形成免疫复合物，洗涤后加入酶标记的抗原，与免疫复合物中抗体结合形成酶标抗原-待检抗体-固相抗原复合物，加底物显色，显色强弱与待检血清中的HBsAb含量呈正比，以此判断被检血清中是否存在HBsAb。（3）竞争抑制法原理：将核心抗原或e抗原结合于固相载体上，加入待检血清和酶标记的特异性抗体。待检血清标本中的抗体与酶标记的抗体竞争结合固相载体上的抗原。温育后洗涤，加入底物显色，显色强弱与待检血清中的HBcAb或HBeAb含量呈反比，以此判断被检血清中是否存在HBcAb或HBeAb。知识点：ELISA的基本原理ELISA的基本原理：是把抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；将特异性抗原或抗体与某种酶连接，形成既有免疫活性，又有酶活性的抗原或抗体的酶标记物，测定时将受检样品（含待测抗体或抗原）和酶标记抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体反应形成抗原抗体复合物；用洗涤的方法将固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例；加入底物后，底物被固相载体上的酶催化变成有色产物，色的深浅与待测物的含量相关。ELISA法在进行血清学检测时有哪些影响因素，这些影响因素可导致出现什么样的实验结果？如何减少或避免干扰因素的影响？ELISA法检测肝炎病毒感染血清标志物的操作虽然简便易行，但因参与ELISA反应的成分和影响因素较多，涉及试验本身以及标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果。其中最常见的影响因素有以下几个方面。思路1：固相载体ELISA法中使用可溶性抗原（或抗体）吸附于固相载体而成为不溶形式，这是进行酶标记测定的基本条件。每批微量反应板对抗原或抗体蛋白质的吸附性差别显著。实验证明，吸附效果与塑料的类型及其表面性质有关。特别是塑料制品在加工过程中因工艺不同或受其他因素的影响而造成吸附性能的极大差异，甚至可能完全丧失吸附能力，致使最后的试验结果出现假阴性。思路2：抗原/抗体在ELISA法中，包被于固相载体表面的抗原（或抗体）的来源和制备方法对试验结果均有影响。包被所用的抗原（或抗体）必须是可溶性的，而且要求是优质和稳定的制剂，纯度和免疫原性要高。如果不纯或受到污染，抗原（或抗体）中所含杂质就会竞争固相载体上的有限位置，降低敏感性和特异性。在制备包被抗原（或抗体）过程中其免疫学活性遭到破坏也会使试验结果出现假阴性。思路3：试验样品患者血清样本要求新鲜采集使用，血清分离彻底不带纤维蛋白等成分。若为了收集批量样本需暂时放置冰箱（4℃）中保存，应将血清分离后再放冰箱，如将采集的全血样本直接放置冰箱保存将会因标本溶血等影响试验结果。此外，存放冰箱的时间不宜过长，否则会使大部分IgM和少量IgG丧失活性而使试验结果出现假阴性。还需注意从冰箱取出的样本必须复温后才能进行检测。如样本放置冰箱温度为-20℃或以下，最好只复融一次就检查完毕，如经反复冻融其抗体效价将呈指数降低。思路4：试验操作在ELISA试验操作过程中，孵育后的清洗不彻底可能会导致血清非特异性物质残留引起试验结果的假阳性，若是清洗过度，又可能将特异性血清标志物洗脱而导致结果假阴性。思路5：试剂试剂超过保存效期、试剂保存方式不正确或试剂受到污染，都可能会影响实验结果。思路6：钩状效应（hookeffect）在双位点一步法中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成“夹心复合物”。类似于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同；如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落，所以这种现象被称为钩状效应。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质（如HBsAg）时，应注意可测范围的最高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。此外，如出现可疑结果或已知为高抗原含量的标本，适当稀释标本后再进行检测可排除钩状效应的影响，得到较为准确的结果。思路7：质量控制注意前述影响因素并尽量避免。每块板均设由权威机构出售的定量阳性、阴性对照和弱阳性对照质控品以及试剂盒中的阳性、阴性对照可监控操作过程，减少假阳性和假阴性的发生。规范化培训专业操作人员也是保证质量的重要环节。
注：本文资料来源于《临床检验医学》
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